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白喉毒素细胞消融是研究活体动物再生的一项重要技术

2016年12月12日

作者:List Labs

作者:Suzanne Canada博士

白喉毒素是一种重要的工具,用于选择性杀伤(消融)细胞的研究目的。使用这种技术,被称为毒素受体介导的细胞敲除当它第一次使用的时候[1]在美国,研究人员可以有选择地移除活老鼠体内的一种特定类型的细胞,而不必生成转基因“敲除”动物,这可能更耗时。这些动物被改造成在特定细胞类型的表面表达白喉毒素(DT)受体。这些动物在接触DT之前都是正常的,DT作为一种蛋白质合成的有效抑制剂,只杀死那些表达DT受体的细胞。这项技术是探索特定细胞类型在疾病中的作用的有力工具,并被用于研究垂体细胞的恢复和t细胞在炎症性结肠炎中的作用。

垂体在内分泌系统中起着重要的作用,它负责生长发育、应激反应(肾上腺)和代谢(甲状腺)。Willems和他的同事[2]一直在研究垂体的再生-研究可能导致治疗垂体缺损的方法或疗法。在生长激素(GH)细胞的膜上表达DT受体的转基因小鼠被DT处理,选择性地杀死这些细胞。研究人员随后监测了这些消融细胞的再生能力。通过这种技术,他们发现垂体中的干细胞参与了再生过程。年轻的老鼠比年老的老鼠有更强的能力从垂体损伤中恢复。然而,如果损伤时间延长(11天而不是3天),干细胞的反应能力和帮助恢复的能力可能会延迟甚至被阻止。这些研究人员可能会发现如何激活干细胞来促进受损脑下垂体的再生。

细胞再生在消化系统中也起着重要作用:研究人员正在研究t细胞如何调节肠道炎症。活化t细胞的增加与溃疡性结肠炎和克罗恩病的活动性发作有关[Kappler, 2000]。为此,Boschetti和他的同事[3]使用DT选择性地耗尽转基因小鼠肠道中的CD4+、CD25+和Foxp3+调节性t细胞[T-regs]。使用这个过程,研究人员能够消融95%的T-regs。采用流式细胞术监测淋巴结和结肠各t细胞亚群的增殖和恢复情况。通过监测T-regs的恢复,研究人员发现炎症导致调节性t细胞移动到结肠固有层,这些细胞可以抑制体外CD4+效应细胞的增殖。尽管Foxp3+ T-regs不能完全预防小鼠的结肠炎,但它们确实减轻了肠道炎症的严重程度。

这种技术是一种强大的方法,可以选择性地移除小鼠和其他模型系统中的某些细胞,而这些动物天生就没有DT受体。的DT从List Labs推荐,因为它的高纯度可以产生最好的效果。

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参考文献

  1. 齐藤美智子,岩waki Takao, Choji Taya, Hiromichi Yonekawa, Munehiro Noda, Yoshiaki Inui, Eisuke Mekada, Yukio Kimata, Akio Tsuru & Kenji Kohno(2001)白白水毒素受体|[ndash]|介导转基因小鼠的条件和靶向细胞消融。自然生物技术19,746-750。PMID:11479567
  2. Willems C;傅,问;赞美,H;莫顿,F;考克斯,B;陈,J;Vankelecom, H(2016)细胞消融损伤后垂体的再生:时间相关方面和分子分析。内分泌学157 705-21。PMID:26653762
  3. Boschetti G;Kanjarawi R;Bardel E;Collardeau-Frachon年代;Duclaux-Loras R;Moro-Sibilot L;Almeras T;Flourie, B;Nancey年代;Kaiserlian, D(2016)小鼠肠道炎症引发粘膜Foxp3+调节性T细胞的增殖和功能,但损害其从CD4+ T细胞的转化。 J Crohn’s and Colitis advanced access publication 30 June 2016. PMID:27364948
  4. 激活的细胞毒性T细胞在炎症性肠病中的作用。组织病理学杂志,2000 01;15(1):167-72。PMID:10668207

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