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炭疽毒素

炭疽杆菌是炭疽热的病原。炭疽芽孢杆菌产生的主要毒力因子是与γ相连的聚d -谷氨酸胶囊和由保护抗原(PA)、致死因子(LF)和水肿因子(EF)三种成分组成的外毒素。PA是细胞结合和传递成分，LF和EF是引起感染细胞变化的酶。这些蛋白质是无毒的，单独保存;但是，在二元组合中充当毒素。细胞结合成分PA与LF的结合称为致死毒素(LeTx)， PA与EF的结合称为水肿毒素(EdTx)。分泌后，在细胞环境中，83 kDa PA蛋白被膜肽酶裂解，产生63 kDa羧基末端片段，这些片段结合在一起，通常是7个一组形成七聚体。裂解是允许寡聚物发生和暴露PA寡聚物EF和LF结合位点的重要步骤。组装的PA复合物和相关的LF或EF通过内吞作用进入细胞。PA介导LF和EF转移到细胞质，这些酶识别并作用于它们的目标。 The LF component, a zinc-dependent metalloprotease, cleaves the mitogen-activated protein kinase kinase (MAPKK), impairing its function and thereby blocking the MAPK signaling pathway. EF is a calmodulin-dependent adenylate cyclase which creates in the cell excess amounts of cyclic-AMP, disrupting AMP-mediated signaling. In the early stage of infection, LF and EF work together to block the patient’s immune response. List provides several forms of PA, LF and EF. FRET peptide substrates containing a cleavage site for anthrax LF are available as MAPKKide® and can be used to assess the enzymatic activity of LF. Antibodies directed to PA and LF are also in the List Labs catalog.

保护性抗原

保护性抗原(PA)是炭疽毒素的受体结合成分。原始的83 kDa蛋白被细胞蛋白酶裂解，形成活化的63 kDa单体，PA63。在这种形式下，PA63与其他PA63分子聚合形成环状七聚体。PA63具有LF和EF酶特异性的结合位点，允许附着、内吞和易位。PA63应与EF或LF一起使用约7倍过量以中毒细胞。List Labs以几种不同的形式提供PA，

产品# 171为全部83 kDa天然蛋白;
产品# 174是PA63，它是通过酶解和纯化产生的;
产品# 177为PA20，从PA裂解而来的约20kda的碎片。
产品# 175纯化的PA63偶联到FITC用于可视化。
产品# 771从山羊身上纯化的IgG直接作用于PA。

致命的因素

致死因子(LF)是炭疽致死毒素的酶亚单位。当使细胞中毒时，LF与细胞表面的PA结合，并通过由7个PA单体组成的孔进行转运。List Labs提供了几种形式的LF，都是在原生炭疽芽孢杆菌宿主中重组而成的。

产品# 169(LF- a)，是原生LF，推荐给大多数用户，以液体形式提供;
产品# 172(LF- hma)是由List Labs公司生产的原始LF，在n端被发现携带了两个额外的氨基酸，组氨酸和蛋氨酸。本产品仅推荐用于经本产品验证的测定;最后
产品# 176(LF E687C)是LF的一种无酶活性形式，在锌结合位点上携带Glu到Cys的取代。

LF底物和抗体

List Labs设计了MAPKKide®底物，模拟MAPKK家族蛋白LF的原生靶点。这些FRET肽包含LF和荧光团的裂解位点，荧光团是基于荧光共振能量转移(FRET)淬灭的。LF对每个底物的裂解释放荧光团，从而增加荧光强度。以下是携带三种不同荧光团的LF肽底物:

产品# 532是MAPKKide®Plus炭疽致死因子特异性底物。这种肽在抵抗天然样品中可能存在的酶的非特异性裂解方面是显著的。MAPKKide®Plus携带7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)荧光团。
产品# 530MAPKKide®利用o-Abz/Dnp FRET对。校准肽，产物# 539可作为产品#530的未淬火校准肽使用
产品# 531MAPKKide®与FRET对DABCYL/FITC。

List提供了针对LF的抗体对，适合用于elisa。

产品# 768 l亲和纯化的生物素化抗致死因子(chicken lgY)可以检测出C of A中所述的LF。
产品# 769 b炭疽杆菌抗致死因子(chicken lgY)可用于捕获LF。此外，我们还证明了抗体# 769 b可用于捕获LF，并与MAPKKide®Plus底物一起用于定量复杂基质中LF的数量。

水肿因子

水肿因子(水肿因子)是炭疽水肿毒素的酶亚基。当使细胞中毒时，EF与细胞表面的PA结合，并通过由7个PA单体组成的孔进行转运。List Labs提供了两种形式的EF，在原生炭疽芽孢杆菌宿主中重组。

产品# 178由天然序列和n端另一个氨基酸组氨酸组成。
产品# 173是突变体S414N EF，腺苷酸环化酶活性降低。

EF的抗体也是可用的，

产品# 773 l、山羊抗水肿因子。在点印迹和直接ELISA中使用的描述在C of a中。

描述	配方	简写的。	产品#
炭疽杆菌保护性抗原
保护抗原，天然蛋白	在缓冲液中冻干	巴勒斯坦权力机构	171
PA63	在缓冲液中冻干	PA63	174
PA20	在缓冲液中冻干	PA20	177
PA63与FITC偶联	在缓冲液中冻干	PA63-FITC	175
PA抗体
抗pa，山羊IgG	在缓冲液中冻干	Anti-PA	771
炭疽杆菌致死因子
致死因子，原生序列	冷冻液	LF-A	169升
致死因子，原产	冷冻液	LF-HMA	172升
致死因子，原产	在缓冲液中冻干	LF-HMA	172
致死因子，突变体E687C	在缓冲液中冻干	低频E687C	176
如果基质
MAPKKide®Plus AMC	冻干	MAPKKide®+	532
MAPKKide®o-Abz / Dnp	冻干	MAPKKide®530	530
未淬灭校准肽使用#530,MAPKKide®o-Abz/Dnp	冻干		539
MAPKKide®DABCYL / FITC	冻干	MAPKKide®531	531
如果抗体
抗lf，亲和纯化和生物素化(鸡lgY)	在甘油	Anti-LF生物素化的	768升
抗lf，亲和纯化(鸡IgY)		Anti-LF	769 b
来自炭疽杆菌的水肿因子
水肿因子，天然序列与一个额外的氨基酸，组氨酸在n端	在缓冲液中冻干	英孚	178
EF突变体，腺苷酸环化酶活性降低的S447N	在缓冲液中冻干	EF S447N	173
英孚的抗体
抗水肿因子，山羊	冷冻液	Anti-EF	773升

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保护性抗原

致命的因素

LF底物和抗体

水肿因子

发件人:List Labs

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由:douano@www.291q.com

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