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炭疽毒素

炭疽杆菌是炭疽热的病原。炭疽芽孢杆菌产生的主要毒力因子是γ -连接的聚d -谷氨酸胶囊和由三种成分组成的外毒素，保护抗原(PA)、致死因子(LF)和水肿因子(EF)。PA是细胞结合和传递成分，LF和EF是引起感染细胞变化的酶。这些蛋白质是无毒的，分开存放;但是，它们在二元组合中扮演毒素的角色。细胞结合成分PA与LF的结合称为致死毒素(LeTx)， PA与EF的结合称为水肿毒素(EdTx)。分泌后，在细胞环境中，83 kDa的PA蛋白被膜肽酶切割，产生63 kDa的羧基末端片段，这些片段结合，通常以7个组形成七聚体。裂解是允许寡聚和暴露PA寡聚物上的结合位点为EF和LF的必要步骤。组装的PA复合体和相关的LF或EF通过内吞作用进入细胞。PA介导LF和EF向细胞质的转移，这些酶在细胞质中识别并作用于它们的目标。 The LF component, a zinc-dependent metalloprotease, cleaves the mitogen-activated protein kinase kinase (MAPKK), impairing its function and thereby blocking the MAPK signaling pathway. EF is a calmodulin-dependent adenylate cyclase which creates in the cell excess amounts of cyclic-AMP, disrupting AMP-mediated signaling. In the early stage of infection, LF and EF work together to block the patient’s immune response. List provides several forms of PA, LF and EF. FRET peptide substrates containing a cleavage site for anthrax LF are available as MAPKKide® and can be used to assess the enzymatic activity of LF. Antibodies directed to PA and LF are also in the List Labs catalog.

保护性抗原

保护抗原(PA)是炭疽毒素的受体结合成分。原始的83 kDa蛋白被细胞蛋白酶裂解形成活化的63 kDa单体PA63。在这种形式下，PA63与其他PA63分子聚合形成环状七聚体。PA63具有特定于酶LF和EF的结合位点，允许附着、内吞和易位。PA63应与EF或LF一起以大约7倍的过量使用来毒害细胞。List Labs以几种不同的形式提供PA，

产品# 171是整个83 kDa的原生蛋白质;
产品# 174是PA63，是通过酶解和纯化产生的;
产品# 177为PA20，约20 kDA的片段从PA裂解而来。
产品# 175是纯化的PA63结合到FITC进行可视化。
产品# 771从山羊中纯化的IgG直接作用于PA。

致命的因素

致死因子(LF)是炭疽致命毒素的酶亚单位。当使细胞中毒时，LF与细胞表面的PA结合，并通过由七个PA单体构成的孔进行转移。List Labs提供了几种形式的LF，都是在原生的炭疽芽孢杆菌宿主中重组的。

产品# 169(LF- a)，是原生LF，推荐给大多数用户，以液体形式提供;
产品# 172(LF- hma)是由List Labs制造的原始LF，被发现在n端携带了两个额外的氨基酸，组氨酸和蛋氨酸。本产品仅推荐用于用本产品验证的试验中;最后
产品# 176(LF E687C)是一种非酶活性形式的LF，在锌结合位点携带Glu到Cys的取代。

LF底物和抗体

List Labs设计了MAPKKide®底物，它模拟了MAPKK家族蛋白质LF的原生靶点。这些FRET多肽含有基于荧光共振能量转移(FRET)猝灭的LF和荧光团的裂解位点。每一个基底被LF切割释放荧光团，增加荧光强度。以下是携带三种不同荧光团的LF肽底物:

产品# 532是MAPKKide®Plus炭疽致死因子特异性底物。这种肽对自然样品中可能存在的酶的非特异性切割具有显著的抵抗力。MAPKKide®Plus携带荧光团7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)。
产品# 530MAPKKide®使用o-Abz/Dnp FRET对。一个校准肽，产品# 539可作为530号产品的未淬灭校准肽
产品# 531MAPKKide®与FRET对DABCYL/FITC。

列表提供了一对直接到LF的抗体，适合在elisa中使用。

产品# 768 l亲和纯化和生物素化的抗致死因子(鸡lgY)可以检测出如C of A所述的LF。
产品# 769 b炭疽杆菌抗致死因子(鸡lgY)可用于捕获LF。此外，我们已经证明抗体# 769 b可用于捕获LF，并与MAPKKide®Plus底物一起使用，以定量复杂基质中LF的数量。

水肿因子

水肿因子(EF)是炭疽水肿毒素的酶亚单位。当使细胞中毒时，EF与细胞表面的PA结合，并通过由七个PA单体构成的孔进行转移。List Labs提供了两种形式的EF，在原生的炭疽芽孢杆菌宿主中进行重组。

产品# 178由原序列和n端附加的氨基酸组氨酸组成。
产品# 173是一个突变S414N EF突变体，腺苷酸环化酶活性降低。

还有一种EF抗体，

产品# 773 l，山羊抗水肿因子。在点印迹法和直接ELISA法中有描述。

描述	配方	简写的。	产品#
炭疽杆菌的保护性抗原
保护抗原，天然蛋白	在缓冲液中冻干	巴勒斯坦权力机构	171
PA63	在缓冲液中冻干	PA63	174
PA20	在缓冲液中冻干	PA20	177
PA63与FITC结合	在缓冲液中冻干	PA63-FITC	175
PA抗体
抗pa，山羊IgG	在缓冲液中冻干	Anti-PA	771
炭疽芽孢杆菌的致死因子
致命因子，原生序列	冷冻液	LF-A	169升
致命因子，原产品	冷冻液	LF-HMA	172升
致命因子，原产品	在缓冲液中冻干	LF-HMA	172
致命因子，突变体E687C	在缓冲液中冻干	低频E687C	176
如果基质
MAPKKide®Plus AMC	冻干	MAPKKide®+	532
MAPKKide®o-Abz / Dnp	冻干	MAPKKide®530	530
未淬火校准肽与#530,MAPKKide®o-Abz/Dnp一起使用	冻干		539
MAPKKide®DABCYL / FITC	冻干	MAPKKide®531	531
如果抗体
抗lf，亲和纯化和生物素化(鸡lgY)	在甘油	Anti-LF生物素化的	768升
抗lf，亲和纯化(鸡IgY)		Anti-LF	769 b
炭疽芽孢杆菌的水肿因子
水肿因子，天然序列，n端有一个额外的氨基酸，组氨酸	在缓冲液中冻干	英孚	178
EF突变，S447N腺苷酸环化酶活性降低	在缓冲液中冻干	EF S447N	173
英孚的抗体
抗水肿因子，山羊	冷冻液	Anti-EF	773升

炭疽毒素

炭疽毒素

保护性抗原

致命的因素

LF底物和抗体

水肿因子

作者:List Labs

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由:douano@www.291q.com

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作者:List Labs

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由:dpinkston@www.291q.com