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百日咳毒素

百日咳毒素(PTX)是由百日咳博德特氏菌它是导致百日咳的细菌。百日咳毒素是一种多组分蛋白质，由六个非共价结合的亚基组成，分子量约为9至28 kDa。最大的亚基，也称为A原聚体，是一种负责adp核糖转移酶活性的酶;A原聚体将ADP核糖从NAD+转移到Gαi、Gαo或Gαt类G蛋白的α亚基上。五亚基结合复合体也被称为B寡聚物，它允许PTX进入大多数细胞，附着在受体蛋白(包括TLR4和糖蛋白Ib)上的糖基残基上。通过受体介导的内吞作用进入细胞后，PTX通过内体通路和高尔基复合体逆行运输到内质网。A亚基从毒素中释放出来，并通过内质网的膜进行易位，在内质网中，毒素使靶膜结合的G蛋白失活。细胞生物学家使用PTX来消除G蛋白，从而确定Gi/o蛋白依赖的途径。由于毒素受体存在于几种哺乳动物细胞中，百日咳毒素影响大多数培养细胞。此外，百日咳毒素有助于建立自身免疫性疾病的动物模型。例如，将百日咳毒素与髓磷脂抗原一起给小鼠，以创建多发性硬化症——实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的小鼠模型。 List labs offers native pertussis toxin，隔绝百日咳博德特氏菌165菌株。此外，List实验室还生产一种基因不活跃的百日咳毒素以及与之相关的几种毒力因子百日咳博德特氏菌感染。百日咳毒素制剂是高度纯化的，包含所有五个亚单位。对制剂进行测试，以确保内毒素、腺苷酸环化酶和其他毒力因子的污染最小化。每个批次都测试CHO细胞的活性。本地百日咳毒素有以下三种配方:

产品# 179百日咳毒素从b .百日咳菌株165在甘油中冷冻在含有甘油的Tris缓冲液中。它将用冰运输。
产品# 180百日咳毒素从b .百日咳用冻干缓冲液的165菌株进行磷酸盐缓冲液冻干处理。
产品# 181百日咳毒素从b .百日咳菌株165，冻干无盐在水中冷冻干燥，可以用水或缓冲液进行重组。

百日咳毒素突变List Labs出售一种基因灭活的百日咳毒素，即百日咳毒素突变体(PT_{无足轻重的人})．这种蛋白可以用作抗原，也可以用作其他抗原的载体蛋白。百日咳突变蛋白是从百日咳菌株TY-178中分离得到的博代氏杆菌属bronchiseptica。位点定向突变被用来替换酶活性位点上的氨基酸残基。这种突变体虽然减少了，但保留了一些原生毒素的活性。

产品# 184百日咳毒素突变体(R9K, E129A)在磷酸盐缓冲液中冻干，伴随的C of A描述CHO细胞毒性。

腺苷酸环化酶毒素

腺苷酸环化酶毒素(ACT)是一种重要的毒力因子百日咳博德特氏菌。编码的百日咳博德特氏菌cyaA基因，腺苷酸环化酶毒素是一种单肽，表观分子量为220 kDa。该蛋白的n端含有一个腺苷酸环化酶结构域，该结构域与宿主细胞钙调蛋白结合，催化细胞ATP向cAMP的无调节转化。c端是受体结合结构域，包含大量毒素重复序列(RTX)基序，负责与免疫细胞表面的细胞受体结合，转位到细胞胞浆，并在宿主细胞膜上形成阳离子选择性孔。腺苷酸环化酶毒素既抑制又调节宿主的免疫系统，有助于发病b .百日咳。这种毒素的不同寻常之处在于它能穿过哺乳动物的细胞膜并定位于细胞质内。作为一种细胞生物学工具，腺苷酸环化酶已被用于靶向抗原提呈细胞的免疫原性表位的传递。

产品# 188 l腺苷酸环化酶毒素是一种活性酶，作为重组蛋白产生大肠杆菌。本产品在尿素缓冲液中为液体，具体的解冻和稀释说明在附带的A的C中提供。

丝状血凝素(FHA)菌毛2/3 (Fim)

建立一个百日咳博德特氏菌感染是细菌附着在宿主呼吸道的上皮内膜上。两个b .百日咳毒力因子是这一过程的关键，丝状血凝素(FHA)和菌毛(Fim)。FHA，既与表面相关，又由b .百日咳，是一种多功能蛋白质，通过几个结合域促进细菌的附着。由于FHA具有高度的免疫原性，它被包含在许多脱细胞疫苗中。此外，FHA通过多种途径调节宿主免疫反应;这种类型的活动的一个例子是诱导巨噬细胞分泌促炎和抗炎细胞因子。FHA是一种大的，220 kDa螺旋蛋白，由List实验室从本地生产百日咳博德特氏菌165菌株。分离FHA，在Tris缓冲液中进行冻干，并检测其纯度和血凝活性。

产品# 170丝状血凝素(FHA)

菌毛是细胞外蛋白质，像FHA一样，参与细菌与基质的附着。它们是用来将细菌拴在表面上的长结构。根据它们被特定的抗血清识别，有两种菌毛血清型存在b .百日咳fimbriae 2 (Fim 2)和fimbriae 3 (Fim 3)。Fim 2/3由在SDS中分离的亚基组成，分别产生Fim 2和Fim 3的表观分子量分别为22500和22000 Da的成分。Fim 2/3是从培氏阴性突变体中分离出来的百日咳博德特氏菌表达2号菌毛和3号菌毛混合物的惠康菌株28。Fim在Tris缓冲液中冻干，并测试纯度、内毒素和对抗体的反应性。结果将在附带的A. C .中提供，请参阅A. C .有关产品重构的特殊说明。

产品# 186菌毛2/3

Pertactin(打印)

pertatin (PRN)是一种69 kDa的表面定位蛋白百日咳博德特氏菌。 由于其免疫原性和保护特性，它被包括在无细胞百日咳疫苗中。这种蛋白质对博代氏杆菌属发病机理正在调查中;然而，它似乎在克服中性粒细胞介导的清除博代氏杆菌属在形成感染的早期阶段。波斯语是最具多态性的一种b .百日咳蛋白质，在人群中出现了13种以上的变异。List提供的波斯语与当地文化隔离开来b .百日咳菌株165，在HEPES缓冲液中冻干。检查制剂的纯度和对抗体的反应性。

产品# 187Pertactin(打印)

描述	配方	简写的。	产品#
百日咳毒素从b .百日咳	冻结在甘油	PTX	179
百日咳毒素从b .百日咳	冻干的缓冲	PTX	180
百日咳毒素从b .百日咳	冻干,无盐	PTX	181
百日咳毒素突变	冻结在甘油	PTMUT	184
腺苷酸环化酶毒素	冻结在甘油	行为	188升
丝状血凝素	冻干的缓冲	联邦住房管理局	170
菌毛2/3	冻干的缓冲	鱼翅	186
pertatin, 69 kDa蛋白	冻干的缓冲	打印	187

百日咳毒素和毒力因子

百日咳毒素

腺苷酸环化酶毒素

丝状血凝素(FHA)菌毛2/3 (Fim)

Pertactin(打印)

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由:douano@www.291q.com

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